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    人骨成型蛋白7(BMP-7)檢測ELISA試劑盒使用方法
    點擊次數:582 更新時間:2022-10-12

    人骨成型蛋白7(BMP-7)檢測ELISA試劑盒使用方法:


    1. 標準品的稀釋:本試劑盒提供原倍標準品一支,用戶可按照下列圖表在小試管中進行稀釋。


    5號標準品              150μl的原倍標準品加入150μl標準品稀釋液


    4號標準品              150μl的5號標準品加入150μl標準品稀釋液


    3號標準品             150μl的4號標準品加入150μl標準品稀釋液


    2號標準品             150μl的3號標準品加入150μl標準品稀釋液


    1號標準品             150μl的2號標準品加入150μl標準品稀釋液


    2. 加樣:分別設空白孔(空白對照孔不加樣品及酶標試劑,其余各步操作相同)、標準孔、待測樣品孔。在酶標包被板上標準品準確加樣50μl,待測樣品孔中先加樣品稀釋液40μl,然后再加待測樣品10μl(樣品終稀釋度為5倍)。加樣將樣品加于         酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻。


    3. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  


    4. 配液:將30倍濃縮洗滌液用蒸餾水30倍稀釋后備用


    5. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30后棄去,如此重復5次,拍干。


    6. 加酶:每孔加入酶標試劑50μl,空白孔除外。


    7. 溫育:用封板膜封板后置37℃溫育30分鐘。  


    8. 洗滌:小心揭掉封板膜,棄去液體,甩干,每孔加滿洗滌液,靜置30后棄去,如此重復5次,拍干。


    9. 顯色:每孔先加入顯色劑A50μl,再加入顯色劑B50μl,輕輕震蕩混勻,37℃避光顯色15分鐘.


    10. 終止:每孔加終止液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。


    11. 測定:以空白空調零,450nm波長依序測量各孔的吸光度(OD值)。 測定應在加終止液后15分鐘以內進行。

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