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ELISA試劑盒包被條件的優化
點擊次數:1198 更新時間:2016-04-13
ELISA試劑盒包被條件的優化:
1.包被液的選擇:一般常用的是pH9.6的碳酸鹽緩沖液,如果包被的抗原在堿性條件下不穩定的話,也可以使用pH7.2的磷酸鹽緩沖液。
2.包被濃度的選擇:包被的zui適濃度隨固相載體和包被物的性質變化,一般蛋白質的包被濃度為1- 5ug/ml,要明確針對特定包被抗原的zui適包被濃度需要通過實驗來確定。
3.包被溫度的選擇:通常是4-8度條件下放置一個晚上或者37度保溫2小時,我們強烈建議4-8度條件下包被,有利于蛋白活性的保持。
4.包被抗原的選擇:可分為天然蛋白、重組蛋白和小分子抗原三大類。小分子抗原比如多肽以及一些小分子有機化合物,由于分子量太小,往往難于直接吸附在酶標板上,一般都先使其與無關蛋白質,比如BSA等偶聯,偶聯物吸附于固相載體上。