細(xì)胞簡介：

背根神經(jīng)節(jié)是各椎間孔內(nèi)側(cè)面附近脊髓背根的膨脹結(jié)節(jié)。神經(jīng)節(jié)是功能相同的神經(jīng)元細(xì)胞體在以外的周圍部位集合而成的結(jié)節(jié)狀構(gòu)造。

細(xì)胞特性：

1）組織來源于實(shí)驗(yàn)動物的正常脊髓組織。

2）細(xì)胞鑒定：NSE熒光染色為陽性。

3）經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4）不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5）細(xì)胞生長方式：不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 Delf原代神經(jīng)元細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

實(shí)驗(yàn)報(bào)告：

一、分離與培養(yǎng)：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復(fù)此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細(xì)胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸，接種于25cm2培養(yǎng)瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

5、差速貼壁1h后，吸出培養(yǎng)基，按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng)；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí)，棄去培養(yǎng)基，用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min；

2、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細(xì)胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細(xì)胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜；

5、PBS沖洗細(xì)胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

注意事項(xiàng)：

1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好，培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象，若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書，了解細(xì)胞相關(guān)信息，如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等，確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致，若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題，責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面，顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題，部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

4. 貼壁細(xì)胞可以消化，懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞，并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中，置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片，記錄細(xì)胞狀態(tài)，便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€別敏感細(xì)胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況，請及時(shí)和我們聯(lián)系，告知細(xì)胞的具體情況，以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

8. 備注：運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞，請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

公司正在出售的產(chǎn)品：

大鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(GCSF)檢測試劑盒 ，英文名： GCSF ELISA Kit

Mouse free testosterone (F-TESTO) ELISA Kit 小鼠游離(F-TESTO)檢測試劑盒

Ratendotoxin,ETELISAKit 大鼠內(nèi)毒素(ET)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGAD-Ab(Mouseglamicaciddecarboxylaseaoaibody)ELISAKit小鼠谷脫羧酶自身抗體

細(xì)胞過氧化酶活性染色試劑盒50次

ratProstaglandinE1,PG-E1ELISAKit大鼠前列腺素E1(PGE1)檢測試劑盒

FCGR1重組小鼠 CD64 / FCGR1 蛋白 (His & AVI 標(biāo)簽), Biotinylated Protein

AD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原(人 0.5mgAD7C-NTP/NTP/AF peptide 神經(jīng)絲蛋白蛋白多肽抗原(人)

MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白  Protein

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽)

REG4 Protein Rat 重組大鼠 REG4 蛋白 (His 標(biāo)簽)

促生長激素釋放激素(GHRH)重組蛋白 Recombinant Growth Hormone Releasing Hormone (GHRH)

FCGR3A Protein Human 重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Val, His & AVI 標(biāo)簽)

CSNK2A1重組小鼠 CSNK2A1 / CK2A1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

TNFSF8 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD153 / CD30L / TNFSF8 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LIF重組人 LIF 蛋白  Protein

小鼠泛素蛋白(Ub)ELISA 試劑盒

Human serine / threonine protein phosphatase (STK) ELISA Kit 人絲/蘇蛋酸酶(STK)檢測試劑盒

HumanHemolyticcompleme,HcELISAKit 人溶血補(bǔ)體(Hc)檢測試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanapoptosisinducingfactor,AIF檢測試劑盒人凋亡誘導(dǎo)因子(AIF)檢測試劑盒

植物葉片高質(zhì)化葉綠體分離試劑盒10次

HumaissuePolypeptideAigen，TPAELISAKit人組織多肽抗原(TPA)檢測試劑盒

小鼠背根神經(jīng)節(jié)細(xì)胞線粒體促凋亡蛋白 (SMAC)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白 A(SP-A)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

和活化調(diào)節(jié)趨化因子 (TARC)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

表達(dá)化學(xué)因子 (TECK)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝