① 組織塊培養(yǎng)法

組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養(yǎng)法

③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

④器官培養(yǎng)

器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

產(chǎn)品名稱：人肝癌相關(guān)成纖維細(xì)胞

英文名稱：Human primary liver cancer associated fibroblasts;CAFs

組織來源：肝癌組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

肝癌是一種惡性程度，預(yù)后極差的惡性腫瘤，雖然現(xiàn)代新的腫瘤化療、生物和手段非常多，但由于其早期診斷率低、術(shù)后復(fù)發(fā)率高而預(yù)后差。化療是目前肝癌的主要輔助手段之一。

腫瘤相關(guān)成纖維細(xì)胞是腫瘤微環(huán)境中主要的細(xì)胞成分之一，在惡性腫瘤的發(fā)生、發(fā)展中起著重要作用。

細(xì)胞特性：

1）細(xì)胞來源于人肝癌組織。

2)細(xì)胞鑒定：纖維連接蛋白（Fibronectin）或波形蛋白（Vimentin）熒光染色為陽性。

3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。

4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。

5)細(xì)胞生長方式：梭形細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。

推薦培養(yǎng)基：

我們推薦使用 delf 原代成纖維細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。

取材→分離→培養(yǎng)和維持

1、取材

人和動(dòng)物細(xì)胞的取材是原代細(xì)胞培養(yǎng)成功的首要條件，直接影響細(xì)胞的體外培養(yǎng)。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應(yīng)嚴(yán)格無菌

③ 防止機(jī)械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應(yīng)注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動(dòng)物體內(nèi)(或胚胎組織)由于多種細(xì)胞結(jié)合緊密，不利于各個(gè)細(xì)胞在體外培養(yǎng)中生長繁殖，必須將現(xiàn)有的組織塊充分散開，使細(xì)胞解離出來。

(1)懸浮細(xì)胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。

(2)實(shí)體組織材料的分離方法

對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機(jī)械分散法

特點(diǎn):簡(jiǎn)便、快速,但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團(tuán)塊(或糊狀)，應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長。

小鼠仙臺(tái)病毒抗體(HVJ-Ab)檢測(cè)試劑盒

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)檢測(cè)試劑盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神經(jīng)元性烯醇化酶(NNE)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70檢測(cè)試劑盒雞熱休克蛋白70(HSP-70)檢測(cè)試劑盒

載玻片細(xì)胞CDK3蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測(cè)試劑盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠熱休克蛋白90(HSP-90)檢測(cè)試劑盒

IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原)

CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽)

EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

Kiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor 0.5mgKiss-1(Metastasis-suppressor KiSS-1 precursor) 轉(zhuǎn)移抑制基因(抗原)

ABHD10 Protein Human 重組人 ABHD10 蛋白 (aa 53-306, His 標(biāo)簽)

IL2RA重組食蟹猴 IL2RA 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

EGFR Protein Mouse 重組小鼠 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白

CDON重組人 CDON / CDO 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

魚糖胺聚糖(GAG)ELISA檢測(cè)試劑盒

Human ai thyroglobulin aibody (ATGA/TGAB) ELISA Kit 人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)檢測(cè)試劑盒

PorcineAngiopoietin1,ANG-1ELISAKit 豬血管生成素1(ANG-1)檢測(cè)試劑盒 進(jìn)口分裝

ADVIgG腺病毒IgG混合型(間接法二步法)

血液乙醇脫氫酶III活性比色法定量檢測(cè)試劑盒20次

MousesolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit小鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)檢測(cè)試劑盒

人肝癌相關(guān)成纖維細(xì)胞魚類狀腺原酸(T3)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類(Coisol)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類甲狀腺素(T4)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

魚類超敏C反應(yīng)蛋白(hs-CRP)檢測(cè)試劑盒     試劑盒   組裝/原裝

視天氣狀況和運(yùn)輸距離遠(yuǎn)近,公司與客戶協(xié)商后選擇下述方式中的一種進(jìn)行。

1)1mL凍存細(xì)胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進(jìn)行運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)盡快解凍復(fù)蘇細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng),如無法立刻進(jìn)行復(fù)蘇操作,凍存細(xì)胞可在-80℃的條件下保存1個(gè)月。

T-25培養(yǎng)瓶充滿培養(yǎng)基后進(jìn)行常溫運(yùn)輸;收到細(xì)胞后請(qǐng)鏡下觀察細(xì)胞生長狀態(tài),如鋪瓶率超過85%請(qǐng)立即進(jìn)行傳代操作,如懸浮的細(xì)胞較多,請(qǐng)將培養(yǎng)瓶至于培養(yǎng)箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細(xì)胞能夠再次貼壁。

本公司的所有產(chǎn)品僅用于科學(xué)研究或者工業(yè)科研等非醫(yī)療目的，不可用于人類或動(dòng)物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用