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    產(chǎn)品名稱:T2細(xì)胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞說明書

    產(chǎn)品特點(diǎn):T2細(xì)胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞說明書上海一研生物相關(guān)產(chǎn)品:原人參二醇 CAS 30636-90-9 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    馬兜鈴酸A CAS 313-67-7 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    樟腦 CAS 76-22-2 規(guī)格:30mg 訂購|咨詢

    庚烯磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 23560-59-0 規(guī)格:0.1g 訂購|咨詢

    琥酯 CAS 88495-63-0 規(guī)格:20m

    產(chǎn)品型號:

    更新日期:2021-03-23

    訪問次數(shù):493

    T2細(xì)胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞說明書的詳細(xì)資料:

    細(xì)胞培養(yǎng)方法:
    1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
    ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
    ②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
    ③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
    ④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
    ⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
    ⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
    2、細(xì)胞復(fù)蘇:
    ①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
    ②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
    3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
    ①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
    ②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入*培養(yǎng)基終止消化;
    ③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
    ④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

    下列是產(chǎn)品的訂購信息:

    產(chǎn)品名稱

    T2細(xì)胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞說明書

    英文名稱

    T2 cells, HLA-2 transgenic B cells

    貨號

    EY-X63959

    細(xì)胞培養(yǎng)的優(yōu)點(diǎn):
    1.研究的對象是活細(xì)胞
    在實(shí)驗(yàn)過程中,根據(jù)要求可始終保持細(xì)胞活力,并可長時(shí)間監(jiān)控、檢測甚至定量評估一部分活細(xì)胞的情況,包括活細(xì)胞的形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生命活動等。
    2.研究條件可以人為控制
    pH、溫度、氧氣、二氧化碳、張力等物理化學(xué)的條件,可以根據(jù)實(shí)際需要進(jìn)行人為的控制,同時(shí),可以施加化學(xué)、物理、生物等因素作為條件而進(jìn)行實(shí)驗(yàn)觀察,這些因素同樣可以處于嚴(yán)格控制之下。
    3.研究的樣本可以達(dá)到比較均一性
    通過細(xì)胞培養(yǎng)一定代數(shù)后,所得到的細(xì)胞系則可以達(dá)到均一性而屬于同一類型的細(xì)胞,需要時(shí),可采用克隆化等方法使細(xì)胞達(dá)到純化。
    4.研究內(nèi)容便于觀察、檢測和記錄
    采用各種研究技術(shù):如倒置生物顯微鏡、熒光顯微鏡、電子顯微鏡、流式細(xì)胞術(shù)、激光共焦顯微鏡、免疫組織化學(xué)、原位雜交、同位素標(biāo)記等各種儀器設(shè)備。
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    培養(yǎng)操作步驟
    1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 
    2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 
    3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 
    4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片*浸在培養(yǎng)液中; 
    5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及免疫細(xì)胞化學(xué)檢測。 
    實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:
    1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 
    2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為優(yōu)質(zhì)玻璃,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 
    3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 
    4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 
    5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

    原人參二醇 CAS 30636-90-9 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    馬兜鈴酸A CAS 313-67-7 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    樟腦 CAS 76-22-2 規(guī)格:30mg 訂購|咨詢

    庚烯磷;純品型;標(biāo)準(zhǔn)品;有證書 CAS 23560-59-0 規(guī)格:0.1g 訂購|咨詢

    琥酯 CAS 88495-63-0 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    乙酰苯胺 CAS  規(guī)格:1000mg 訂購|咨詢

    原蘇木素B; 原巴蘇木素 CAS 102036-29-3 規(guī)格:HPLC≥98%,10mg/支 訂購|咨詢

    山梔苷 CAS  規(guī)格:HPLC≥98%;20mg 訂購|咨詢

    CAS 32222-06-3 規(guī)格:10mg 訂購|咨詢

    間氨基酚 CAS  規(guī)格:50mg 訂購|咨詢

    乙素;Tripdiolide CAS 38647-10-8 規(guī)格:20mg 訂購|咨詢

    T2細(xì)胞,轉(zhuǎn)HLA-2基因B細(xì)胞說明書FITC標(biāo)記的羊抗人IgGGoat Anti-human IgG/FITC 0.3ml

    膠體金標(biāo)記的羊抗人IgGGoat Anti-human IgG/Gold 0.5ml

    FITC標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/FITC 0.3ml

    辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗馬IgMRabbit Anti-horse IgM/HRP 0.1ml

    Alexa Fluor 488標(biāo)記的羊抗人IgGGoat Anti-human IgG/Alexa Fluor 488 0.1ml

    PE標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-human IgG(3D3)/PE 0.1ml

    Alexa Fluor 647標(biāo)記的小鼠抗人IgGMouse Anti-human IgG/Alexa Fluor 647 0.1ml

    辣根過氧化物酶標(biāo)記兔抗人IgARabbit Anti-human sIgA/HRP 0.1ml

    標(biāo)記的鼠抗人IgG單克隆抗體Mouse Anti-human IgG(3D3)/Bio 0.1ml

    標(biāo)記的兔抗人IgGRabbit Anti-human IgG/Bio 0.1ml

    標(biāo)記的小鼠抗人IgGMouse Anti-human IgG/Bio 0.1ml

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