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    產品名稱:輕型鏈球菌LAMP試劑盒

    產品特點:輕型鏈球菌LAMP試劑盒上海一研生物相關產品:對克利西丁--對磺偶合劑To Clifford Xiding - p-aminobenzenesulfonate couplers:321.35 C14H15N3O4S:40947-69-1

    4-聯:179.224- cyanobiphenyl:2920-38-9 C

    產品型號:50次

    更新日期:2021-03-03

    訪問次數:536

    50次輕型鏈球菌LAMP試劑盒的詳細資料:

    參數規格:

    產品名稱

    輕型鏈球菌LAMP試劑盒

    英文名稱

     Lamp kit for Streptococcus mitis

    規格

    50次

    儲存條件:
    僅用于科研14℃或-20℃樣品收集、處理及保存方法
    1. 血清:使用不含熱原和內毒素的試管,操作過程中避免任何細胞刺激,收集血液后,3000 轉離心10 分鐘將血清和紅細胞迅速小心地分離。
    2. 血漿:EDTA、檸檬酸鹽或肝素抗凝。3000 轉離心30 分鐘取上清。
    3. 細胞上清液:3000 轉離心10 分鐘去除顆粒和聚合物。
    4. 組織勻漿:將組織加入適量生理鹽水搗碎。3000 轉離心10 分鐘取上清。
    5. 保存:如果樣本收集后不及時檢測,請按一次用量分裝,凍存于-20℃,避免反復凍融,在室溫下解凍并確保樣品均勻地充分解凍。
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    使用方法:
    一、樣品 DNA 的制備
    用自選方法提取 Cps DNA。注意:DNA 純化方法是決定檢測靈敏度的關鍵因素。如果不能很好純化樣品 DNA,后面的 PCR 再靈敏也不能提高整體檢測靈敏度。
    二、制備 Cps 標準曲線(以 10-10E6 這 6 個 10 倍稀釋度為例。由于標準品濃度非常高,因此下列稀釋操作一定要在獨立的區域進行,千萬不能污染樣品或本試劑盒的其他成分)。為增加產品穩定性和避免擴散傳染性病原,本產品不提供活體病毒做陽性對照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DN**段作為陽性對照。
    1. 標記 6 個離心管,分別為 6,5,4,3,2 和 1 號。
    2. 用帶芯槍頭分別加入 45 μL 超純水(用帶芯槍頭,下同)。
    3. 先將本試劑盒提供的陽性對照用 TE 緩沖液或超純水 10 倍梯度稀釋到10E7 拷貝/μL(注:請不要將本試劑盒提供的標準品一次性稀釋至 10E7拷貝/μL,建議每次稀釋 10 倍,梯度稀釋至 10E7 拷貝/μL)。
    4. 在 6 號管中加入 5 μL 10E7 拷貝/μL 的 Cps 陽性對照(上步稀釋所得),充分震蕩 1 分鐘,得 10E6 拷貝/μL 的陽性對照。
    5. 換槍頭,從 6 號管中取 5 μL 溶液到 5 號管中,充分震蕩 1 分鐘,得 10E5拷貝/μL 的陽性對照。
    6. 換槍頭,從 5 號管中取 5 μL 溶液到 4 號管中,重復上面的操作直到得到 6個稀釋度的陽性對照。
    7. NC 管中不加任何陽性對照。
    8. 從 1-6 號管中分別取 5 μL 和待測樣品一起進行定量 PCR(見下步),每個樣品做 3 次重復。PCR 后得到每個陽性對照稀釋樣品的熒光 PCR Ct 值,并以之為縱軸,以濃度的對數值為橫軸,繪制標準曲線。 
    檢測步驟:
    一、 試劑的準備
    從試劑盒中取出熒光PCR反應液(BC-qPCR MIX)、酶混合物(Enzymes MIX),冰上融化并振蕩混勻后,10000rpm離心10s。
    設所需要的PCR反應管管數為N(N=樣本數+1管陰性對照+1管陽性對照),每個測試反應體系配制如下表:
    試劑 每個反應加入的量 N個反應加入的量
    熒光PCR反應液 14µL N×14µL
    酶混合物 1 µL N×1 µL
    總量 15 µL N×15µL
    1) 計算好各試劑的使用量,加入一適當體積潔凈離心管中,充分混勻,10000rpm離心10s,向設定的N個PCR反應管中分別加入15μL熒光PCR反應液,向每管中加入處理后樣品或陰性對照(NTC)和陽性對照(BC-PTC)5μL,10000rpm瞬時離心10秒。
    7.2 qPCR反應條件
    將各反應管放入定量PCR儀器的反應槽內。
    循環條件:
    1循環 50℃ for 2 min
    預變性 1循環 95℃ for 10 min
    PCR擴增 40循環 95℃ for 15 sec
    60℃ for 60 sec
    60℃延伸時收集熒光信號。報告基團:設置為FAM。淬滅基團:NONE,請勿選擇ROX參比熒光。

    性藏青GGRAcid navy blue GGR::

    萘酚AS-BI硫鉀鹽Naphthol AS-BI potassium sulfate::78689

    紫脲銨Ammonium urea:284.19 C8H8N6O6:3051-09-0

    Digoxin:780.94C41H64O14:20830-75-5

    1-乙炔-3,5-二氟:138.1141- -3,5- two - ethynyl:151361-87-4 C8H4F2

    4-啉:163.64- chloride:611-35-8 C9H6ClN

    2-溴-5-氯甲:205.482- -5- chloride:14495-51-3 C7H6BrCl

    對克利西丁--對磺偶合劑To Clifford Xiding - p-aminobenzenesulfonate couplers:321.35 C14H15N3O4S:40947-69-1

    4-聯:179.224- cyanobiphenyl:2920-38-9 C13H9N

    輕型鏈球菌LAMP試劑盒 BAK1 基因全長ORF克隆 (表達載體), 帶FLAG標簽

    METAP1 基因全長ORF克隆

    DR6 / TNFRSF21 基因全長ORF克隆

    大鼠 ST6GAL1 基因全長ORF克隆

    PPIL1 基因全長ORF克隆

    HSD17B7 基因全長ORF克隆

    Axl Kinase 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

    食蟹猴 DPP4 / DPPIV / CD26 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

    RBPJ 基因全長ORF克隆

    CFH / Complement Factor H 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

    大鼠 ALCAM / CD166 人細胞裂解液 (陽性對照) (變性)

    MORF4L2 基因全長ORF克隆

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