產(chǎn)品僅供研究使用，不適用于人類或臨床診斷
商品屬性：

產(chǎn)品英文名稱：Human PDGF-BB Protein

產(chǎn)品中文名稱：重組人血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）

規(guī)格：5 μg/20 μg/100 μg/1 mg

貨號：EY-01X8726
用途：僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

特點(diǎn)&優(yōu)勢:

表達(dá)宿主:大腸桿菌

種屬:人

序列:氨基酸序列來源于： 表達(dá)人PDGF-BB (Ser82-Thr190) (P01127)。

蛋白長度：重組人PDGF-BB由109個氨基酸組成，預(yù)測分子量為12.3 kDa。

純度:> 98 %，使用SDS-PAGE檢測

通過LAL法測定，每微克蛋白里內(nèi)毒素含量<1 EU。

產(chǎn)品形式:凍干粉，凍干緩沖液為無菌的PBS.

基因ID:5155

使用中注意事項(xiàng):開蓋使用前，請先離心。本產(chǎn)品為凍干粉，推薦用該產(chǎn)品配套的Reconstitution Buffer進(jìn)行復(fù)溶，且濃度不動?動

背景

Platelet derived growth factor (PDGF) is a potent mitogen and chemoattractant for mesenchymal and osteogenic cells and stimulates angiogenic molecules which play an essential role in bone regeneration. PDGF-BB is a member of PDGF family, which promotes cell proliferation, survival and migration, through binding to the tyrosine kinase PDGF receptor.

本產(chǎn)品具有下列特點(diǎn):

 1.操作簡便、快捷。可直接加入到檢測平板。在96-孔板中檢測時,無需洗滌或收獲細(xì)胞,免去溶解步驟。

2. 無放射性。不需要配制液閃混合物,也不需要處理廢棄物。

3. 與MTT相比,使用更安全。不需要使用揮發(fā)性的有機(jī)溶劑來溶解甲臜產(chǎn)物。

4. 操作靈活,與MTT不同,平板讀數(shù)后可放回溫箱繼續(xù)孵育,使顏色進(jìn)一步生成。

操作步驟：

(一)獲得目的基因

1、通過PCR方法:以含目的基因的克隆質(zhì)粒為模板,按基因序列設(shè)計(jì)一對引物(在上游和下游引物分別引入不同的酶切位點(diǎn)),PCR循環(huán)獲得所需基因片段。

2、通過RT-PCR方法:用TRIzol法從細(xì)胞或組織中提取總RNA,以mRNA為模板,逆轉(zhuǎn)錄形成cDNA第一鏈,以逆轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物為模板進(jìn)行PCR循環(huán)獲得產(chǎn)物。

(二)構(gòu)建重組表達(dá)載體

1、載體酶切:將表達(dá)質(zhì)粒用限制性內(nèi)切酶(同引物的酶切位點(diǎn))進(jìn)行雙酶切,酶切產(chǎn)物行瓊脂糖電泳后,用膠回收Kit或凍融法回收載體大片段。

2、PCR產(chǎn)物雙酶切后回收,在T4DNA連接酶作用下連接入載體。

(三)  獲得含重組表達(dá)質(zhì)粒的表達(dá)菌種

1、 將連接產(chǎn)物轉(zhuǎn)化大腸桿菌DH5α,根據(jù)重組載體的標(biāo)志(抗Amp或藍(lán)白斑)作篩選,挑取單斑,堿裂解法小量抽提質(zhì)粒,雙酶切初步鑒定。

2、 測序驗(yàn)證目的基因的插入方向及閱讀框架均正確,進(jìn)入下步操作。否則應(yīng)篩選更多克隆,重復(fù)亞克隆或亞克隆至不同酶切位點(diǎn)。

3、 以此重組質(zhì)粒DNA轉(zhuǎn)化表達(dá)宿主菌的感受態(tài)細(xì)胞。

(四)誘導(dǎo)表達(dá)

1、挑取含重組質(zhì)粒的菌體單斑至2ml LB(含Amp50μg/ml)中37℃過夜培養(yǎng)。

2、按1∶50比例稀釋過夜菌,一般將1ml菌加入到含50mlLB培養(yǎng)基的300ml培養(yǎng)瓶中, 37℃震蕩培養(yǎng)至OD600≌0.4-1.0(*0.6,大約需3hr)。

3、取部分液體作為未誘導(dǎo)的對照組,余下的加入IPTG誘導(dǎo)劑至終濃度0.4mM作為實(shí)驗(yàn)組,兩組繼續(xù)37℃震蕩培養(yǎng)3hr。

4、分別取菌體1ml, 離心12000g×30s收獲沉淀,用100μl 1%SDS重懸,混勻, 70℃10min。

5、離心12000g×1min,取上清作為樣品,可做SDS-PAGE等分析。

公司正在出售的產(chǎn)品：

CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta 0.5mgCD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受體β鏈抗原

IGSF11 Protein Human 重組人 IGSF11 / BTIGSF 蛋白

MARCO重組小鼠 MARCO 蛋白 Protein

OLR1 Protein Rat 重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白

STAT4重組人 STAT4 蛋白 Protein

豚鼠血清淀粉樣蛋白A(SAA)檢測試劑盒 ，英文名： SAA ELISA Kit

Human proteinase 3 specific ai neuophil cytoplasmic aibody (PR3-ANCA) ELISA Kit 人蛋白酶3特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)檢測試劑盒

Monkeyfollicle-stimulatinghormone,FSHELISAKit促卵泡素(FSH)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBMP-2ELISAKit大鼠骨成型蛋白2

細(xì)菌內(nèi)毒素凝膠法定量檢測試劑盒20次

Rabbitmaixmetalloproteinase1,MMP-1ELISAKit兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

嗜酸粒細(xì)胞直接計(jì)數(shù)液   Product name said

網(wǎng)織紅細(xì)胞計(jì)數(shù)液   Alkaline phosphatase stain

   Acid phosphatase stain

尿蛋白定性測試盒   Acid esterase stain

大鼠利肽受體1(NPR1)檢測試劑盒 ，英文名： NPR1 ELISA Kit

Monkey follicle stimulating hormone (FSH) ELISA Kit促卵泡素(FSH)檢測試劑盒

RatIerferonα,IFN-αELISAKit 大鼠α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforGABA(MouseGamma-aminobyricacid)ELISAKit小鼠γ氨基

細(xì)胞過氧化氫(HYDROGENPEROXIDE)活性化學(xué)發(fā)光法定量檢測試劑盒20次

RatProinsulin,PIELISAKit大鼠胰島素原(PI)檢測試劑盒規(guī)格：96T/48T

重組人血小板衍生生長因子BB（PDGF-BB）MARCO重組小鼠 MARCO 蛋白 Protein

CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta 0.5mgCD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta) CD122/白介素2受體β鏈抗原

STAT4重組人 STAT4 蛋白 Protein

IGSF11 Protein Human 重組人 IGSF11 / BTIGSF 蛋白

OLR1 Protein Rat 重組大鼠 OLR1 / LOX1 蛋白