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    產(chǎn)品名稱:大鼠氣管成纖維細胞

    產(chǎn)品特點:大鼠氣管成纖維細胞公司正在出售的產(chǎn)品CL187/CCL187細胞,人大腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,M14細胞 人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826] LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液 293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系 小鼠原B細胞

    產(chǎn)品型號:

    更新日期:2024-12-10

    訪問次數(shù):142

    大鼠氣管成纖維細胞的詳細資料:

    大鼠氣管成纖維細胞

    實驗報告:

    大鼠氣管成纖維細胞
    一、分離與培養(yǎng):

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實驗需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    細胞簡介:

    大鼠氣管成纖維細胞

    大鼠氣管成纖維分離自氣管組織;氣管(Trachea),呼吸器官的一部分;為后壁略平的圓筒型管狀。上端平第六頸椎下緣,與環(huán)狀軟骨相連;向下至第四、五胸椎體(相當(dāng)胸骨角平面)交界處,分左、右主支氣管,分叉處稱為氣管杈。氣管主要由14-16個半環(huán)狀軟骨構(gòu)成,有彈性,軟骨為“C"字形的軟骨環(huán),缺口向后,各軟骨環(huán)以韌帶連接起來,環(huán)后方缺口處由平滑肌和致密結(jié)締組織連接,保持了持續(xù)張開狀態(tài)。管腔襯以粘膜,表面覆蓋纖毛上皮,粘膜分泌的粘液可粘附吸入空氣中的灰塵顆粒,纖毛不斷向咽部擺動將粘液與灰塵排出,以凈化吸入的氣體。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結(jié)締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質(zhì)細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu),其細胞核呈規(guī)則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質(zhì)嗜弱堿性,具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現(xiàn)跟纖維細胞的互相轉(zhuǎn)化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的支氣管成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養(yǎng)基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現(xiàn)為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態(tài),細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質(zhì)透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網(wǎng)狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。氣管成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構(gòu)造和維持組織的正常形態(tài),合成和釋放細胞外基質(zhì)以及組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。

    產(chǎn)品名稱

    大鼠氣管成纖維細胞

    組織來源

    氣管

    英文名稱

    Rat Tracheal   Fibroblast Cells

    產(chǎn)品規(guī)格

    5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶

     

    方法簡介:

    大鼠氣管成纖維細胞

    實驗室分離的大鼠氣管成纖維采用膠原酶-聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

    質(zhì)量檢測

    實驗室分離的大鼠氣管成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    培養(yǎng)信息:

    大鼠氣管成纖維細胞

    培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    換液頻率:每2-3天換液一次

    生長特性:貼壁

    細胞形態(tài):成纖維細胞樣

    傳代特性:可傳3代左右

    消化液:0.25%

    培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%CO25%

    大鼠氣管成纖維體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的培養(yǎng)狀態(tài)。

    大鼠氣管成纖維細胞

    注意事項:

    大鼠氣管成纖維細胞
    1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時和我們聯(lián)系。

    2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如細胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

    3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

    4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進行培養(yǎng)。

    5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細胞培養(yǎng)。

    6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運輸?shù)脑颍瑐€別敏感細胞會出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時和我們聯(lián)系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

    7. 該細胞僅供科研使用。

    8. 備注:運輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細胞,請換用按照說明書細胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

    9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

    公司正在出售的產(chǎn)品:
    大鼠氣管成纖維細胞

    大鼠泛素蛋白(Ub)檢測試劑盒 ,英文名: Ub ELISA Kit

    Porcine Immunoglobulin M (IgM) ELISA Kit 豬免疫球蛋白M(IgM)檢測試劑盒

    雞特定基因序列(Chicken)核酸檢測試劑盒 48T

    CLIAKitforM-AChRM3(HumanmuscarinicacetylcholinereceptorM3)ELISAKit人受體亞型M3

    體液游離氨基酸含量比色法定量檢測試劑盒20

    ELISAKitLT家蠶卵黃蛋白

    TEK重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

    線粒體外膜轉(zhuǎn)位酶70A(TOMM70A)重組蛋白 Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)

    NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

    CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

    HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

    線粒體外膜轉(zhuǎn)位酶70A(TOMM70A)重組蛋白 Recombinant Translocase Of Outer Mitochondrial Membrane 70A (TOMM70A)

    CD200R1 Protein Human 重組人 CD200R1 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

    TEK重組人 Tie2 / CD202b 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein

    HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/bar-headed goose/Qinghai/14/2008) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

    NTM重組人 NTM / Neurotrimin 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

    小鼠受體(FOLR)檢測試劑盒 96T/48T

    Residues of rat and bovine serum albumin detection ELISA Kit 大鼠的牛血清白蛋白殘留檢測檢測試劑盒

    HumanSpecifieMacrophageArmingPaetot,SMAFELISAKit 人特異性巨噬細胞武裝因子(SMAF)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

    CLIAKitfor17-KSELISAKit大鼠17-同類固醇

    飲料抗壞血酸比色法定量檢測試劑盒20

    MouseLeptospiraIgG,LepIgGELISAKit小鼠鉤端IgG(LepIgG)檢測試劑盒96T96T

    大鼠氣管成纖維細胞小鼠組胺(mouse Histamine)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

    小鼠熱休克蛋白70(mouse HSP70)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

    小鼠羥脯酸(mouse HYP)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝

    小鼠高遷移率族蛋白(mouse HMGB1)   作用:   ELISA   規(guī)格:      進口分裝


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