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    產(chǎn)品中心Products 當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 人原代細(xì)胞 > 產(chǎn)品詳情

    產(chǎn)品名稱:人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    產(chǎn)品特點(diǎn):人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品Hela(人細(xì)胞) HT-29(人結(jié)腸癌細(xì)胞) 人胚胎眼鞏膜成纖維細(xì)胞;HFSF SK-MES-1細(xì)胞,人肺鱗癌細(xì)胞 狗腎細(xì)胞,MDCK細(xì)胞 CM-M066小鼠膀胱成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基KIR2DL1 Others Human 人 KIR2DL1 / CD158a

    產(chǎn)品型號(hào):

    更新日期:2024-12-11

    訪問次數(shù):141

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞的詳細(xì)資料:

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
    一、分離與培養(yǎng):

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

    2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

    5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    細(xì)胞簡介:

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    人表皮角質(zhì)形成分離自皮膚組織;表皮位于動(dòng)物皮膚的外層,由胚胎時(shí)期外胚層形成,具有抗摩擦和抗損傷的作用。表皮是皮膚的淺層結(jié)構(gòu),由復(fù)層扁平上皮構(gòu)成。從基底層到表面可分為五層,即基底層、棘層、顆粒層、透明層和角質(zhì)層。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞是一種能合成角質(zhì)蛋白的上皮細(xì)胞,此類細(xì)胞為表皮的主體,由表皮深層始逐漸增殖、分化,并在成為角化的角質(zhì)細(xì)胞中,細(xì)胞核與細(xì)胞器消失,細(xì)胞亦失去生理功能而脫落。未脫落部分對機(jī)體尚有保護(hù)作用,故不必在洗擦身體時(shí)用力搓擦,使其過早脫失。表皮角質(zhì)形成細(xì)胞主要分布于表皮基底層,在上皮程序性死亡后,細(xì)胞產(chǎn)生角化并移向表皮。體外培養(yǎng)的表皮角化細(xì)胞容易導(dǎo)致終末分化,不能充分增殖。角質(zhì)形成細(xì)胞終產(chǎn)生角質(zhì)蛋白,在其向角質(zhì)細(xì)胞演變過程中,一般可以分為四層,即基底層、棘層、顆粒層以及角質(zhì)層。有人把前三層或前二層稱為生發(fā)層或馬爾匹基層。此外,在某些部位,特別在掌跖部位,角質(zhì)層下方還可見到透明層。

    產(chǎn)品名稱

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    組織來源

    皮膚組織

    英文名稱

    Human Epidermal   Keratinocyte Cells

    產(chǎn)品規(guī)格

    5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

     

    方法簡介:

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成層先消化、后-膠原酶混合消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

    質(zhì)量檢測

    公司實(shí)驗(yàn)室分離的人表皮角質(zhì)形成經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

    培養(yǎng)信息:

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2

    培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    換液頻率 每2-3天換液一次

    生長特性 貼壁

    細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

    傳代特性 可傳1-2

    消化液 0.25%

    培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    注意事項(xiàng):

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞
    1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

    2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

    3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

    4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

    5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

    6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

    7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

    8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

    9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

    公司正在出售的產(chǎn)品:
    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞

    小鼠內(nèi)皮型合成酶3(eNOS-3)ELISA 試劑盒

    People of coicosterone / coicosterone (CO) ELISA Kit 人皮質(zhì)酮/腎上腺酮(CO)檢測試劑盒

    HumanAcylationStimulatingProtein,ASPELISAKit 人酰化刺激蛋白(ASP)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

    Human8-isoprostaglandin,8-iso-PG檢測試劑盒人8異前列腺素(8-iso-PG)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

    正常大鼠(SpragueDawley)腎組織微粒體組分(5毫克/毫升)500微升

    Mouseai-IgEreceptoraibodyELISAKit小鼠抗IgE受體抗體檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

    IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

    NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經(jīng)元素3抗原

    ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

    CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

    FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

    NGN3(neurogenin 3; Neurog3 0.5mgNGN3(neurogenin 3; Neurog3) 神經(jīng)元素3抗原

    CDH2 Protein Human 重組人 N-Cadherin / CD325 / CDH2 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽)

    IL22RA1重組狗 IL22RA1 / IL22R 蛋白 Protein

    FABP4 Protein Mouse 重組小鼠 FABP4 / ALBP / A-FABP / AFABP 蛋白

    ADRBK1重組人 GRK2 / ADRBK1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein

    小鼠細(xì)胞間粘附分子2(ICAM-2/CD102)ELISA 試劑盒 96T/48T

    Human phosphorylated exacellular signal regulated kinase (pERK) ELISA Kit 0酸化細(xì)胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶(pERK)檢測試劑盒

    HumanPancreaticLipase,PLELISAKit 人胰脂肪酶(PL)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

    ChickenIerferonα,IFN-α檢測試劑盒雞α干擾素(IFN-α)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

    載玻片細(xì)胞DHPR受體蛋白表達(dá)熒光顯微鏡檢測試劑盒10/20

    MouseGranulocyteColonyStimulatingFactor,G-CSFELISAKit小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

    人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞小鼠心肌肌鈣蛋白Ⅰ(cTn-)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    小鼠腺病毒(ADV)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    小鼠纖維蛋白肽BFPB)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

    小鼠纖溶抑制因子/激活的纖溶抑制物(TAFI)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝


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