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    產(chǎn)品中心Products 當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 原代細(xì)胞 > 人原代細(xì)胞 > 產(chǎn)品詳情

    產(chǎn)品名稱:人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    產(chǎn)品特點(diǎn):人角膜基質(zhì)細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品ILKAP Others Human 人 ILKAP 人細(xì)胞裂解液 TNFSF8 Others Human 人 CD30 Ligand / TNFSF8 人細(xì)胞裂解液 CM-R086大鼠真皮成纖維細(xì)胞培養(yǎng)基原代骨骼肌細(xì)胞特制基礎(chǔ)無血清培養(yǎng)基Many

    產(chǎn)品型號(hào):

    更新日期:2024-12-11

    訪問次數(shù):134

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞的詳細(xì)資料:

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    實(shí)驗(yàn)報(bào)告:

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞
    一、分離與培養(yǎng):

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細(xì)胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養(yǎng)基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復(fù)此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網(wǎng)過濾細(xì)胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細(xì)胞用含有10% FBS DMEM/F12培養(yǎng)基混懸,接種于25cm2培養(yǎng)瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

    5、差速貼壁1h后,吸出培養(yǎng)基,按實(shí)驗(yàn)需要接種于6孔板中繼續(xù)培養(yǎng);二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細(xì)胞生長至80%融合時(shí),棄去培養(yǎng)基,用溫育的PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細(xì)胞15min;

    2、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細(xì)胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細(xì)胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細(xì)胞過夜;

    5、PBS沖洗細(xì)胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    細(xì)胞簡介:

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    人角膜基質(zhì)分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部薄。角膜有十分敏感的神經(jīng)末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會(huì)不由自主地合上以保護(hù)眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細(xì)胞層、前彈力層、基質(zhì)層、后彈力層、內(nèi)皮細(xì)胞層。角膜基質(zhì)層是角膜的主要組成部分,占據(jù)角膜厚度的90%,由角膜基質(zhì)細(xì)胞、膠原纖維和細(xì)胞外基質(zhì)構(gòu)成。角膜基質(zhì)層缺損的修復(fù)主要由角膜基質(zhì)細(xì)胞的增殖及分泌細(xì)胞外基質(zhì)完成。角膜基質(zhì)層具有結(jié)構(gòu)規(guī)整,透明度高的特點(diǎn),正常情況下角膜基質(zhì)細(xì)胞分泌組成基質(zhì)層的成分,維持角膜的透明度,此細(xì)胞對于角膜損傷的修復(fù)具有重要意義。角膜基質(zhì)細(xì)胞,存在于角膜基質(zhì)層中,在正常情況下,處于靜止?fàn)顟B(tài)。但當(dāng)角膜損傷時(shí),不同上皮來源的因子及環(huán)境信號(hào),將影響角膜基質(zhì)細(xì)胞的應(yīng)答反應(yīng),決定著角膜能否被修復(fù)。

    產(chǎn)品名稱

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    組織來源

    眼角膜組織

    英文名稱

    Human Corneal   Stromal Cells

    產(chǎn)品規(guī)格

    5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

     

    方法簡介:

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)采用膠原酶消化后組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

    質(zhì)量檢測

    公司實(shí)驗(yàn)室分離的人角膜基質(zhì)經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

    培養(yǎng)信息:

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    換液頻率 每2-3天換液一次

    生長特性 貼壁

    細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

    傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳

    消化液 0.25%

    培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%CO25%

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    注意事項(xiàng):

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞
    1. 收到細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。

    2. 仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞相關(guān)信息,如細(xì)胞形態(tài)、所用培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子等,確保細(xì)胞培養(yǎng)條件一致,若由于培養(yǎng)條件不一致而導(dǎo)致細(xì)胞出現(xiàn)問題,責(zé)任由客戶自行承擔(dān)。

    3. 用75%酒精擦拭細(xì)胞瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問題,部分細(xì)胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現(xiàn)象。觀察好細(xì)胞狀態(tài)后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養(yǎng)箱放置4-6h。

    4. 貼壁細(xì)胞可以消化,懸浮細(xì)胞直接混勻收集細(xì)胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細(xì)胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養(yǎng)基重懸細(xì)胞,并接種到新的培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)皿中,置于培養(yǎng)箱中進(jìn)行培養(yǎng)。

    5. 請客戶用相同條件的培養(yǎng)基用于細(xì)胞培養(yǎng)。

    6. 建議客戶收到細(xì)胞后前3天各拍幾張細(xì)胞照片,記錄細(xì)胞狀態(tài),便于和我司技術(shù)部溝通交流。由于運(yùn)輸?shù)脑颍瑐€(gè)別敏感細(xì)胞會(huì)出現(xiàn)不穩(wěn)定的情況,請及時(shí)和我們聯(lián)系,告知細(xì)胞的具體情況,以便我們的技術(shù)人員跟蹤回訪直至問題解決。

    7. 該細(xì)胞僅供科研使用。

    8. 備注:運(yùn)輸用的培養(yǎng)基(灌液培養(yǎng)基)不能再用來培養(yǎng)細(xì)胞,請換用按照說明書細(xì)胞培養(yǎng)條件新配制的*培養(yǎng)基來培養(yǎng)細(xì)胞。收到細(xì)胞后次傳代建議1:2傳代 。

    9.注意: 1:2傳代就是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)T25瓶或者2個(gè)6cm皿。不是1個(gè)T25瓶傳2個(gè)10cm皿。

    公司正在出售的產(chǎn)品:
    人角膜基質(zhì)細(xì)胞

    大鼠生長調(diào)節(jié)致癌基因α(GROα/CXCL1/MGSA)檢測試劑盒 ,英文名: GROα/CXCL1/MGSA ELISA Kit

    Neuroophic factor mouse glial cell line derived (GDNF) ELISA Kit 小鼠膠質(zhì)細(xì)胞系來源的神經(jīng)營養(yǎng)因子(GDNF)檢測試劑盒

    MouseRetinol-bindingprotein4,RBP-4ELISAKit 小鼠結(jié)合蛋白4(RBP-4)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

    CLIAKitforHumanPeosidineELISAKit人戊糖素

    同位素[γ32P]ATP激酶標(biāo)記GST融合蛋白篩選試劑盒10

    ELISAKitx大鼠硫氧化還原蛋白

    HA重組甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

    RNF148(Ring finger protein 148 0.5mgRNF148(Ring finger protein 148) 環(huán)指蛋白148抗原

    TNFRSF10D重組人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 Protein

    CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

    IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

    RNF148(Ring finger protein 148 0.5mgRNF148(Ring finger protein 148) 環(huán)指蛋白148抗原

    CGB5 Protein Human 重組人 CGB5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

    HA重組甲型流感 H13N8 (A/black-headed gull/Netherlands/1/00) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 Protein

    IFNB1 Protein Human 重組人 Interferon beta / IFN-beta / IFNB 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)

    TNFRSF10D重組人 TRAIL R4 / CD264 / TNFRSF10D 蛋白 Protein

    小鼠特異生長因子/相關(guān)因子(TSGF)ELISA 試劑盒 96T/48T

    Human ai mitochondrial aibody (AMA) ELISA Kit 人抗線粒體抗體(AMA)檢測試劑盒

    Humanproteindisulfideisomerase,PDIELISAKit 人蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)酶(PDI)檢測試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

    CLIAKitforACA-IgA(Humanai-cardiolipinaibodyIgA)ELISAKit人抗心0脂抗體IgA

    液相法去內(nèi)毒素試劑盒20

    Mouseosteonectin,ONELISAKit小鼠骨粘連蛋白(ON)檢測試劑盒規(guī)格:96T/48T

    人角膜基質(zhì)細(xì)胞小鼠糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    小鼠甲狀腺素抗體(TAb)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    小鼠抗促甲狀腺素受體抗體(Ab)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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