① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：人脈絡膜血管內皮細胞

英文名稱：Human Choroidal Vascular Endothelial Cells

組織來源：脈絡膜組織

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

人脈絡膜血管內皮分離自眼球脈絡膜組織；脈絡膜在視網膜和鞏膜之間，含有豐富血管和色素細胞，對外力沖擊的耐受性較視網膜差，當眼球受到從前面來的外力的沖擊作用通過玻璃體傳到后極部時，堅硬的鞏膜在其外面又有抵抗作用，使脈絡膜在內外兩種作用夾攻下而發生破裂和出血。脈絡膜呈暗褐色，圍繞視神經乳頭部有照膜，為青綠色帶金屬光澤的三角形區。脈絡膜是眼球中膜的后2/3處的薄膜，由纖維組織、小血管和毛細血管組成，軟而薄，棕紅色，在鞏膜和視網膜之間，續連于睫狀體后方。脈絡膜的血循環營養視網膜外層，其含有的豐富色素起遮光暗房作用。主要功能是營養視網膜外層及玻璃體，并有遮光作用，使反射的物象清楚。同時對視覺系統起保護作用，對整個視覺神經有調節作用。續連于睫狀體后方，含豐富的血管和色素細胞，有營養和遮光作用。

公司實驗室分離的人脈絡膜血管內皮采用膠原酶-混合消化法并通過內皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的人脈絡膜血管內皮經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

大鼠抗酸性0酸酶(ACP5)檢測試劑盒 ，英文名： ACP5 ELISA Kit

Monkey glial fibrillary acidic protein (GFAP) ELISA Kit神經膠質纖維酸性蛋白(GFAP)檢測試劑盒

RaeninELISAKit 大鼠腎素(Renin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforFree-T3(MouseFreei-iodothyronineIndes)ELISAKit小鼠游離三甲狀腺原

細胞活化10(FACTORXa)活性比色法定量檢測試劑盒20次

Ratplaceagrowthfactor,PLGFELISAKit大鼠胎盤生長因子(PLGF)檢測試劑盒規格：96T/48T

S100B重組小鼠 S100B / S100beta 蛋白 (Fc 標簽) Protein

端粒酶關聯蛋白1(TEP1)重組蛋白 Recombinant Telomerase Associated Protein 1 (TEP1)

DDR2重組人 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白 Protein

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

IL17RA Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IL17RA / IL17R 蛋白 (Fc 標簽)

白蛋白(ALB)天然蛋白 Native Albumin (ALB)

IGJ Protein Human 重組人 IGJ / Immunoglobulin J chain 蛋白

TCN2重組小鼠 TCN2 / Transcobalamin-II 蛋白 Protein

IFNA1 Protein Rat 重組大鼠 IFN-alpha / IFNA1 / IFN 蛋白 (Fc 標簽)

B3GNT2重組人 B3GNT2 蛋白 (Fc 標簽) Protein

豚鼠血清(NO)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat signal ansduction molecule 1 (Smad1) ELISA Kit 大鼠信號轉導分子1(Smad1)檢測試劑盒

Humanendomorphin-2,EM-2ELISAKit 人內肽-2(EM-2)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCryoglobulin,CG檢測試劑盒人冷球蛋白(CG)檢測試劑盒規格：96T/48T

組織D-乳酸比色法定量檢測試劑盒20次

humanProstaglandinD2-methoxime,PGD2-MOXELISAKit人甲肟前列腺素D2(PGD2-MOX)檢測試劑盒規格：96T/48T

人脈絡膜血管內皮細胞嗜酸性粒細胞趨化因子 (Eotaxin)   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 Biosource

Human Eotaxin-2/MPIF-2/CCL24   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

Human Eotaxin-3/CCL26   作用：   ELISA   規格：   96T   美國 R&D

促紅細胞生成素 (EPO)   作用：   ELISA   規格：   96T   德國 DRG

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用