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    產品名稱:人真皮成纖維細胞

    產品特點:人真皮成纖維細胞公司正在出售的產品Promocell C-20111 Keratinocyte GrowthMedium 2 KIT, 角質細胞生長培養基2型套裝 500ml, IL18R1 Others Canine 狗 IL18R1 人細胞裂解液 CST7 Others Human 人 Cystatin-F / CST7 / Cystatin-7

    產品型號:

    更新日期:2024-12-12

    訪問次數:133

    人真皮成纖維細胞的詳細資料:

    人真皮成纖維細胞

    實驗報告:

    人真皮成纖維細胞
    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大小;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    細胞簡介:

    人真皮成纖維細胞

    人真皮成纖維分離自真皮組織;真皮,位于表皮深層,向下與皮下組織相連,真皮結締組織的膠原纖維和彈性纖維互相交織在一起,埋于基質內。其內分布著各種結締組織細胞和大量的膠原纖維彈性纖維,使皮膚既有彈性,又有韌性。其由兩層組成——乳頭層與網狀層。真皮的結構組成是膠原蛋白、彈性纖維以及基質。成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的真皮成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。真皮成纖維細胞在生理條件下的主要功能包括:構造和維持組織的正常形態,合成和釋放細胞外基質以及組織損傷后及時大量聚集修復損傷組織。

    產品名稱

    人真皮成纖維細胞

    組織來源

    皮膚組織

    英文名稱

    Human Dermal   Fibroblast Cells

    產品規格

    5×105cells/T25細胞培養瓶

     

    方法簡介:

    人真皮成纖維細胞

    公司實驗室分離的人真皮成纖維采用先消化、后-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

    質量檢測

    公司實驗室分離的人真皮成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    培養信息:

    人真皮成纖維細胞

    培養基 含FBS、生長添加劑、PenicillinStreptomycin

    換液頻率 每2-3天換液一次

    生長特性 貼壁

    細胞形態 成纖維細胞樣

    傳代特性 可傳5代左右;3代以內狀態佳

    消化液 0.25%

    培養條件 氣相:空氣,95%CO25%

    人真皮成纖維細胞

    注意事項:

    人真皮成纖維細胞
    1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

    2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

    3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正常現象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

    4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

    5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

    6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

    7. 該細胞僅供科研使用。

    8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

    9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

    公司正在出售的產品:
    人真皮成纖維細胞

    人載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒

    Human tumor specific aigen (TSA) ELISA Kit 人腫瘤特異性抗原(TSA)檢測試劑盒

    HumanADisiegrinAndMetalloprotease8,ADAM8ELISAKit 人解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

    Humaninsulinaoaibodies,IAA檢測試劑盒人胰島素自身抗體(IAA)檢測試劑盒規格:96T/48T

    組織基質金屬蛋白酶(MMP-9)琥珀酰明膠法比色定量檢測試劑盒20

    HumanLegionellaaibodyIgMLPAb-IgMELISAKit人軍團菌抗體IgM(LPAb-IgM)檢測試劑盒規格:96T/48T

    AKT3重組小鼠 AKT3 蛋白 (aa 106-479, His & GST 標簽) Protein

    甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白 Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)

    CDH1重組人 E-Cadherin / CDH1 / E-cad / CD324 蛋白 (Fc 標簽) Protein

    IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

    FCGR2B Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 CD32b / FCGR2B 蛋白

    FK506結合蛋白樣蛋白(FKBPL)重組蛋白 Recombinant FK506 Binding Protein Like Protein (FKBPL)

    IL9 Protein Human 重組人 IL-9 / Interleukin-9 蛋白

    TFPI2重組小鼠 TFPI2 / PP5 蛋白 Protein

    ERBB2 Protein Rat 重組大鼠 HER2 / ErbB2 蛋白

    FKBP7重組人 PPIase / FKBP7 蛋白 Protein

    豚鼠白三烯D4(LTD4)ELISA 試劑盒 96T/48T

    Rat angiotensin II (ANG- II) ELISA Kit 大鼠血管緊張素Ⅱ(ANG-)檢測試劑盒

    humansinglesandedDNAAibody,ssDNAELISAKit 人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體(ssDNA)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

    HumanCyclin-dependekinase7,CDK-7檢測試劑盒人周期素依賴性激酶7(CDK-7)檢測試劑盒規格:96T/48T

    組織GSK3α激酶活性定量檢測試劑盒(A/B/C)20

    HumanPolymorphonuclearElastase,PMNElastaseELISAKit人多形核白細胞彈性蛋白酶(PMNElastase)檢測試劑盒規格:96T/48T

    人真皮成纖維細胞人脂蛋白脂酶(LPL)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    中文名稱   方法   規格

    人糖原0酸化酶同工酶II(GP-II)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

    人糖原0酸化酶同工酶MM(GP-MM)ELISAKit   ELISA.   96T/48T


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