① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

產品名稱：兔肝外膽管上皮細胞

英文名稱：Rabbit Extrahepatic Bile Duct Epithelial Cells

組織來源：膽管

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

兔肝外膽管上皮分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內以代謝功能為主的一個器官，并在身體里面起著去氧化、儲存肝糖、分泌性蛋白質的合成等作用；肝臟也制造消化系統中之膽汁。肝臟是機體內臟里大的器官，位于機體中的腹部位置，在右側橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機體消化系統中大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機體位置和形態結構：肝臟位于右上腹，隱藏在右側膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復蓋，僅在腹上區、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見的膽管病變如膽道閉鎖、先天性膽總管囊腫、原發性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細胞為病變的靶位，引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細胞的生物學特征和病變膽管上皮細胞的病理生理學特征對研究膽管病變的發病機制、診斷和治療具有重要意義。

實驗室分離的兔肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯合消化，接種至預先包被鼠尾膠原的培養瓶中，通過上皮細胞專用培養基培養篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

實驗室分離的兔肝外膽管上皮經Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長特性：貼壁

細胞形態：上皮細胞樣

傳代特性：可傳1-2代

消化液：0.25%

培養條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

兔肝外膽管上皮體外培養周期有限；建議使用配套的專用生長培養基及正確的操作方法來培養，以此保證該細胞的佳培養狀態。

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

小鼠γ基(GABA)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠5羥色胺(5-HT)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠P物質受體(SP-R)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠P物質(SP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3 Ab)試劑盒 96T/48T

Rat phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒

humanAzidothymidine,AZTELISAKit 人(AZT)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAb試劑盒人抗髓鞘相關糖蛋白抗體(MAGAb)試劑盒規格：96T/48T

植物染色質免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次

HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒規格：96T/48T

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原

METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein

EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標簽)

IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標簽)

Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原

EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標簽)

HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標簽)

METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein

兔肝外膽管上皮細胞大鼠膜聯蛋白A2(ANXA2)試劑盒 ，英文名： ANXA2 ELISA Kit

Mouse insulin ELISA Kit (INS) 小鼠胰島素(INS)試劑盒

RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforGFAP(Mouseglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit小鼠神經膠質纖維酸性蛋白

細胞甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續循環比色法定量試劑盒20次

RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規格：96T/48T

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用