細胞簡介：

小鼠海綿體平滑肌分離自海綿體組織；海綿體，又稱海綿體肌，是硬的平滑肌和結締組織。海綿體是一種勃起組織，外面包有堅厚的白膜，內部由結締組織和平滑肌組成海綿狀支架，其腔隙與血管相通。它主要包括海綿體內皮細胞、平滑肌細胞和成纖維細胞3種細胞成分。其中平滑肌細胞和成纖維細胞鑲嵌于海綿體細胞外基質的膠原中，在消化海綿體組織時，膠原酶的作用主要是松解海綿體內皮細胞與基膜的聯系，破壞海綿體內皮細胞間的緊密連接。因此可用膠原酶分離出海綿體平滑肌細胞。平滑肌，是非橫紋肌的肌肉組織。分布在人體動脈和靜脈血管壁、膀胱、子宮、男性和女性生殖道、消化道、呼吸道、眼睛的睫狀肌和虹膜。平滑肌細胞原代分離培養3天后，可見細胞貼壁伸展，細胞形態大小不一，呈梭形、不規則形、三角形或扇形，核卵圓形、居中；2周后細胞匯合，多數細胞伸展呈長梭形，胞漿豐富，有分枝狀突起，細胞平行排列成單層或部分區域多層重疊生長，高低起伏；細胞密度低時，常交織成網狀；密度高時，則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快，4-6天即可匯合，并保持上述形態學特征和生長特點。

方法簡介：

公司實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌采用膠原酶消化法結合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠海綿體平滑肌經α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

培養信息：

培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳1-3代左右

消化液 0.25%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

實驗報告：

一、分離與培養：

1、無菌條件下，取出1-3d 齡SD大鼠心房組織，然后用PBS將此組織塊清洗2次，將組織剪成1mm3左右大小；

2、往組織塊中加入4 mL酶消化液（0.1% 和0.1% I型膠原酶），混懸10s，置37℃條件下消化10min，之后用滴管吹打制成單細胞懸液，自然沉淀并收集上清，用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置；

3、剩下的組織再加入3～4mL酶消化液，混懸10s，置37℃消化10 min后，按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置，重復此步驟2-3次，直至組織被消化；

4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液，1200r/min 離心10min，棄去上清，沉淀細胞用含有10％ FBS DMEM/F12培養基混懸，接種于25cm2培養瓶，放置于37℃ ，5％CO2 培養箱中培養；

5、差速貼壁1h后，吸出培養基，按實驗需要接種于6孔板中繼續培養；二、免疫熒光鑒定：

1、待心房肌細胞生長至80%融合時，棄去培養基，用溫育的PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min；

2、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在4℃條件下，用0.1％Triton X-100透膜15min；

3、PBS沖洗細胞2次，每次10min，然后在室溫條件下，用4% BSA封閉細胞30min；

4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗，然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜；

5、PBS沖洗細胞3次，每次10min，按1：150的比例稀釋抗α-actin的二抗， 37℃條件下放置1h；

6、用PBS沖洗3次，每次10min，在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

公司正在出售的產品：

血紅素氧化酶 (HO-1)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

熱休克蛋白 27(HSP27)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

熱休克蛋白 70(HSP70)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

HA 絲酸肽酶 1 (Ha1)   作用：   ELISA   規格：      進口分裝

小鼠載脂蛋白B100(apo-B100)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human ai neuophil aibody (ANA) ELISA Kit 人抗中性粒細胞抗體(ANA)試劑盒

Humacellreceptor,TCRELISAKit 人T細胞受體(TCR)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforABeta1-40ELISAKit大鼠β淀粉樣蛋白1-40

乙基十六烷基二甲基溴化胺(cetyldimethylethammoniumbromide)1公斤

Mousemyeloperoxidase-aineuophilcytoplasmicaibodyIgG,MPO-ANCAIgGELISAKit小鼠髓過氧化物酶特異性抗中性粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)試劑盒規格：96T/48T

NA重組甲型流感 H1N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein

Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原

GFRA1重組人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein

CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白

FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 標簽)

Rad51 Rad51抗原 0.5mgRad51 Rad51抗原

CCL18 Protein Human 重組人 CCL18 / PARC / MIP4 蛋白

NA重組甲型流感 H1N1 神經酶 (Neuraminidase / NA) (H274Y mutation) (高活性) Protein

FAS Protein Human 重組人 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白 (Fc 標簽)

GFRA1重組人 GFRA1 / GFRα1 / GDNFRA 蛋白 Protein

小鼠海綿體平滑肌細胞大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)試劑盒 ，英文名： BMP-2 ELISA Kit

Porcine procollagen peptide (P III NP) ELISA Kit 豬Ⅲ型前膠原肽(PⅢNP)試劑盒

埃博拉病毒(EBOV)核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

CLIAKitforMIP-5(Humanmacrophageinflammatoryprotein5)ELISAKit人巨噬細胞性蛋白5

體液結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性比色法定量試劑盒20次

ELISAKitCD8犬白細胞分化抗原8

注意事項：

1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好，培養液是否有漏液、渾濁等現象，若有上述現象發生請及時和我們聯系。

2. 仔細閱讀細胞說明書，了解細胞相關信息，如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等，確保細胞培養條件一致，若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題，責任由客戶自行承擔。

3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面，顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題，部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片，是正常現象。觀察好細胞狀態后，75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

4. 貼壁細胞可以消化，懸浮細胞直接混勻收集細胞，900 rpm-1000 rpm離心3 min，棄上清。加5 mL PBS重懸細胞，再900 rpm-1000 rpm離心3 min，，用新鮮的*培養基重懸細胞，并接種到新的培養瓶或培養皿中，置于培養箱中進行培養。

5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片，記錄細胞狀態，便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因，個別敏感細胞會出現不穩定的情況，請及時和我們聯系，告知細胞的具體情況，以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

7. 該細胞僅供科研使用。

8. 備注：運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞，請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1：2傳代 。

9.注意： 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。