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    產品名稱:小鼠胚胎成纖維細胞

    產品特點:小鼠胚胎成纖維細胞公司正在出售的產品人胰腺腺泡上皮癌;HPAC 801-D (人巨細胞性肺癌細胞) 人T淋巴瘤轉基因細胞;Jurkat D,E 家貓皮膚細胞;FCA-S1 胚肺成纖維細胞,HFL-I細胞 IEC-6細胞,大鼠小腸隱窩上皮細胞 NAMALWA細胞,

    產品型號:

    更新日期:2024-12-16

    訪問次數:131

    小鼠胚胎成纖維細胞的詳細資料:

    小鼠胚胎成纖維細胞

    實驗報告:

    小鼠胚胎成纖維細胞
    一、分離與培養:

    1、無菌條件下,取出1-3d 齡SD大鼠心房組織,然后用PBS將此組織塊清洗2次,將組織剪成1mm3左右大??;

    2、往組織塊中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型膠原酶),混懸10s,置37℃條件下消化10min,之后用滴管吹打制成單細胞懸液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培養基終止消化后4℃放置;

    3、剩下的組織再加入3~4mL酶消化液,混懸10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并終止消化后4℃放置,重復此步驟2-3次,直至組織被消化;

    4、用200目不銹鋼篩網過濾細胞消化液,1200r/min 離心10min,棄去上清,沉淀細胞用含有10% FBS DMEM/F12培養基混懸,接種于25cm2培養瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培養箱中培養;

    5、差速貼壁1h后,吸出培養基,按實驗需要接種于6孔板中繼續培養;二、免疫熒光鑒定:

    1、待心房肌細胞生長至80%融合時,棄去培養基,用溫育的PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室溫條件下固定細胞15min;

    2、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在4℃條件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;

    3、PBS沖洗細胞2次,每次10min,然后在室溫條件下,用4% BSA封閉細胞30min;

    4、按1: 100的比例稀釋α-actin一抗,然后將其放在4℃冰箱中孵育細胞過夜;

    5、PBS沖洗細胞3次,每次10min,按1:150的比例稀釋抗α-actin的二抗, 37℃條件下放置1h;

    6、用PBS沖洗3次,每次10min,在倒置熒光顯微鏡下觀察圖像并拍照。

    細胞簡介:

    小鼠胚胎成纖維細胞

    小鼠胚胎成纖維分離自胚胎;成纖維細胞(Fibroblast)是疏松結締組織的主要細胞成分,由胚胎時期的間充質細胞分化而來。成纖維細胞較大,輪廓清楚,多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結構,其細胞核呈規則的卵圓形,核仁大而明顯。成纖維細胞功能活動旺盛,細胞質嗜弱堿性,具明顯的蛋白質合成和分泌活動,在一定條件下,它可以實現跟纖維細胞的互相轉化;成纖維細胞對不同程度的細胞變性、壞死和組織缺損的修復有著十分重要的作用。剛分離的胚胎成纖維細胞呈圓形、折光性良好,懸浮于培養基中。30min細胞貼壁,其中部分開始伸出偽足,表現為小的突起;6h后細胞基本貼壁,伸展成梭形,胞核清晰,分布較均勻,散在生長,不聚集成團;細胞生長迅速,5-7天即呈融合狀態,細胞排列緊密,有的交叉重疊生長,平坦、胞體較大,細胞質透明,細胞核較大,呈橢圓形,顏色淡。細胞融合,并彼此連接成網狀;細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。細胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。該細胞常用作ES細胞培養常用的飼養層細胞,能產生抑制ES細胞自主分化和促進ES細胞增殖的因子,故能有效地促進ES細胞的增殖并維持其未分化特性和多潛能性,且分泌效果優于外源添加的一些因子,而且可以為ES細胞的培養提供類似于體內的微環境,故在研究哺乳動物ES細胞中得到廣泛使用。

    產品名稱

    小鼠胚胎成纖維細胞

    組織來源

    胚胎組織

    英文名稱

    Mouse Embryonic   Fibroblast Cells

    產品規格

    5×105cells/T25細胞培養瓶

     

    方法簡介:

    小鼠胚胎成纖維細胞

    公司實驗室分離的小鼠胚胎成纖維采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

    質量檢測

    公司實驗室分離的小鼠胚胎成纖維經Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

    培養信息:

    小鼠胚胎成纖維細胞

    培養基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

    換液頻率 每2-3天換液一次

    生長特性 貼壁

    細胞形態 成纖維細胞樣

    傳代特性 可傳3-5代

    消化液 0.25%

    培養條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

    小鼠胚胎成纖維細胞

    注意事項:

    小鼠胚胎成纖維細胞
    1. 收到細胞后首先觀察細胞瓶是否完好,培養液是否有漏液、渾濁等現象,若有上述現象發生請及時和我們聯系。

    2. 仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關信息,如細胞形態、所用培養基、血清比例、所需細胞因子等,確保細胞培養條件一致,若由于培養條件不一致而導致細胞出現問題,責任由客戶自行承擔。

    3. 用75%酒精擦拭細胞瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態。因運輸問題,部分細胞由于溫度變化及劇烈碰亡破碎形成碎片,是正?,F象。觀察好細胞狀態后,75%酒精消毒瓶壁將T25瓶置于37℃培養箱放置4-6h。

    4. 貼壁細胞可以消化,懸浮細胞直接混勻收集細胞,900 rpm-1000 rpm離心3 min,棄上清。加5 mL PBS重懸細胞,再900 rpm-1000 rpm離心3 min,,用新鮮的*培養基重懸細胞,并接種到新的培養瓶或培養皿中,置于培養箱中進行培養。

    5. 請客戶用相同條件的培養基用于細胞培養。

    6. 建議客戶收到細胞后前3天各拍幾張細胞照片,記錄細胞狀態,便于和我司技術部溝通交流。由于運輸的原因,個別敏感細胞會出現不穩定的情況,請及時和我們聯系,告知細胞的具體情況,以便我們的技術人員跟蹤回訪直至問題解決。

    7. 該細胞僅供科研使用。

    8. 備注:運輸用的培養基(灌液培養基)不能再用來培養細胞,請換用按照說明書細胞培養條件新配制的*培養基來培養細胞。收到細胞后次傳代建議1:2傳代 。

    9.注意: 1:2傳代就是1個T25瓶傳2個T25瓶或者2個6cm皿。不是1個T25瓶傳2個10cm皿。

    公司正在出售的產品:
    小鼠胚胎成纖維細胞

    含量測試盒   可見分光光度法   50管/48樣

    脫氫酶測試盒   紫外分光光度法   50管/48樣

    還原糖含量測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

    纖維素酶(CL)測試盒   可見分光光度法   50管/24樣

    豚鼠免疫球蛋白G2(IgG2)試劑盒 ,英文名: IgG2 ELISA Kit

    Human granulysin (histatin 5) ELISA Kit 人富組蛋白(histatin 5)試劑盒

    rabbitImmunoglobulinG,IgGELISAKit 兔子免疫球蛋白G(IgG)試劑盒 96T/48T 進口分裝

    CLIAKitforBAFF-R(HumanBcellactivationfactorrfromthetumornecrosisfactorfamilyreceptor)ELISAKit人B細胞活化因子受體

    線蟲補骨脂素(4-imethylpsoralen)誘導突變試劑盒10次

    Rabbitcatecholamine,CAELISAKit兔兒茶酚胺(CA)試劑盒規格:96T/48T

    IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

    結合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

    CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

    IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

    HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

    結合蛋白4(RBP4)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 4, Plasma (RBP4)

    IL17RA Protein Human 重組人 IL17RA / CD217 蛋白

    IGFBP3重組人 IGFBP3 / IBP3 蛋白 Protein

    HA Protein H12N5 重組甲型流感 H12N5 (A/green-winged teal/ALB/199/1991) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

    CD48重組人 CD48 / SLAMF2 / BCM1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

    小鼠胚胎成纖維細胞大鼠鈣調素(CAM)試劑盒 ,英文名: CAM ELISA Kit

    Lester pig mononucleosis septozotocin (listeriolysin) ELISA Kit 豬單核細胞增多性李斯特菌素(listeriolysin)試劑盒

    轉基因植物NPTⅡ基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針法) 48T

    CLIAKitforMCP-2/CCL8(Humanmonocytechemotacticprotein2)ELISAkit人單核細胞趨化蛋白2

    體液腺苷酸環化酶(AdenylateCyclase)活性熒光定量試劑盒20次

    ELISAKitIFN-α貓α干擾素


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