產品名稱：小鼠胚胎干細胞

英文名稱：Mouse Embryonic Stem Cells

組織來源：囊胚

產品規格：5×105cells/T25細胞培養瓶

小鼠胚胎干分離自囊胚胚胎組織；胚胎干細胞（Embryonic stem cell，ESCs，簡稱ES、EK或ESC細胞）是早期胚胎（原腸胚期之前）或原始性腺中分離出來的一類細胞，它具有體外培養無限增殖、自我更新和多向分化的特性。無論在體外還是體內環境，ES細胞都能被誘導分化為機體幾乎所有的細胞類型。進一步說，胚胎干細胞（ES細胞）是一種高度未分化細胞。它具有發育的全能性，能分化出成體動物的所有組織和器官，包括生殖細胞。ES細胞具有與早期胚胎細胞相似的形態結構，細胞核大，有一個或幾個核仁，胞核中多為常染色質，胞質胞漿少，結構簡單。體外培養時，細胞排列緊密，呈集落狀生長。用堿性磷酸酶染色，ES細胞呈棕紅色，而周圍的成纖維細胞呈淡黃色。細胞克隆和周圍存在明顯界限，形成的克隆細胞彼此界限不清，細胞表面有折光較強的脂狀小滴。細胞克隆形態多樣，多數呈島狀或巢狀。小鼠ES細胞的直徑7 微米～18 微米，豬、牛、羊ES細胞的顏色較深，直徑12 微米～18 微米。胚胎干細胞與普通細胞有顯著差別，有其特定的生長特性和特定的標志，例如堿性磷酸酶活性非常高，帶有胚胎階段特異性表面抗原（ Stage- specific embryonic antigens,SSEA），人類胚胎干細胞還帶有高分子量的糖蛋白TRA1-60、TRA-1-81等標志，這些特性和標志均可以用于對胚胎干細胞進行鑒定，除此之外，胚胎干細胞還可以在體外傳代，并保持正常核型。在體外培養體系中加入分化抑制劑如白血病抑制因子（ Leukaemia inhibitory factor,LF）或者在小鼠胚胎成纖維細胞飼養層（MEF）上培養時，胚胎干細胞都能呈克隆性增殖，長期保持核型正常和穩定，凍存解凍也不影響不分化的特性。另外，胚胎干細胞還表現岀高水平端粒酶活性，目前證明端粒酶與細胞衰老密切相關，多數成熟細胞的端粒酶活性都很低。這些都是胚胎干細胞與成熟細胞不同的重要特點，也可能是其復制生命期限遠比體細胞長的原因。

公司實驗室分離的小鼠胚胎干采用分離囊胚組織，去除胚胎透明帶、使用特制專用培養基篩選培養，消化傳代純化制備而來，細胞總量約為5×105cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的小鼠胚胎干經Oct-4免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

包被條件 明膠（0.1%）

培養基 含LIF、BMP、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次；

生長特性 貼壁

細胞形態 短梭形、多角形

傳代特性 可傳5-8代左右

消化液 0.025%

培養條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

視天氣狀況和運輸距離遠近,公司與客戶協商后選擇下述方式中的一種進行。

1)1mL凍存細胞懸液裝于1.8ml的凍存管中,置于裝滿干冰的泡沫保溫盒中進行運輸;收到細胞后請盡快解凍復蘇細胞進行培養,如無法立刻進行復蘇操作,凍存細胞可在-80℃的條件下保存1個月。

T-25培養瓶充滿培養基后進行常溫運輸;收到細胞后請鏡下觀察細胞生長狀態,如鋪瓶率超過85%請立即進行傳代操作,如懸浮的細胞較多,請將培養瓶至于培養箱中靜置過夜以幫助未死亡的懸浮細胞能夠再次貼壁。

① 組織塊培養法

組織塊培養是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

② 消化培養法

③ 懸浮細胞培養法

對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養。

④器官培養

器官培養是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環境條件下培養，器官培養可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯系、排列情況和相互影響，以及局部環境的生物調節作用。

本公司的所有產品僅用于科學研究或者工業科研等非醫療目的，不可用于人類或動物的臨床診斷或治療，非藥用，非食用

取材→分離→培養和維持

1、取材

人和動物細胞的取材是原代細胞培養成功的首要條件，直接影響細胞的體外培養。

(1) 取材的基本要求

① 取材要注意新鮮和保鮮

② 應嚴格無菌

③ 防止機械損傷

④ 去除無用組織和避免干燥

⑤ 應注意組織類型、分化程度、年齡等

⑥ 作好記錄

2、分離

人或動物體內(或胚胎組織)由于多種細胞結合緊密，不利于各個細胞在體外培養中生長繁殖，必須將現有的組織塊充分散開，使細胞解離出來。

(1)懸浮細胞的分離方法

組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，的方法是采用1000r/min的低速離心10分鐘。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據需要收獲目的細胞。

(2)實體組織材料的分離方法

對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。

① 機械分散法

特點:簡便、快速,但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。

② 消化分離法

組織消化法是把組織剪切成較小團塊(或糊狀)，應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養后，細胞容易貼壁生長。

大鼠基質金屬蛋白酶13(MMP13)檢測試劑盒 ，英文名： MMP13 ELISA Kit

Mouse cathepsin K (cath-K) ELISA Kit 小鼠組織蛋白酶K(cath-K)檢測試劑盒

RatvisfatinELISAKit 大鼠內脂素/內臟脂肪素(visfatin)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforF1+2(Rabbitprothrombinfragme1+2)ELISAKit兔原片段F1+2

細胞結構型內皮細胞合成酶(cNOS/NOS3/eNOS)活性熒光定量檢測試劑盒20次

Ratmuscarinicacetylcholinereceptor,M-AChRELISAKit大鼠受體(M-AChR)檢測試劑盒規格：96T/48T

LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原

ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein

GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白

ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽)

CEA(Carcinoembryonic Antigen 0.5mgCEA(Carcinoembryonic Antigen )peptide 人癌胚抗原抗原

GAPDH Protein Human 重組人 GAPDH 蛋白

LDLR重組小鼠 LDLR / LDL Receptor 蛋白 Protein

ICOSLG Protein Mouse 重組小鼠 ICOS Ligand / B7-H2 / ICOSLG 蛋白 (His & Fc 標簽)

ACOX1重組人 ACOX1 / aox 蛋白 Protein

小鼠白三烯E4(LTE4)檢測試劑盒 96T/48T

Rat heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 大鼠熱休克蛋白40(HSP-40)檢測試劑盒

HumanSeptokinase,SKELISAKit 人鏈激酶(SK)檢測試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humancaenorhabditiselegansdeathgene,CED-3檢測試劑盒人美麗線蟲凋亡基因(CED-3)檢測試劑盒規格：96T/48T

質粒/蛋白制備樣品內毒素濁度法定量檢測試劑盒20次

HumansolubleP-selectin，sP-selectinELISAKit人可溶性P選擇素(sP-selectin)檢測試劑盒規格：96T/48T

小鼠胚胎干細胞兔子上腺髓質素(ADM)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子神經營養因子4(-4)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子神經營養因子3(-3)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝

兔子神經特異性烯醇化酶(NSE)檢測試劑盒   96T/48T   試劑盒   組裝/原裝